加油新學(xué)期

謹(jǐn)記：對(duì)抗污染，預(yù)防大于一切！

在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，很多小伙伴兒一直受到支原體污染的困擾，我自己養(yǎng)的細(xì)胞曾經(jīng)也遇到過(guò)支原體污染，深受其害呀！針對(duì)于支原體污染來(lái)說(shuō)，大家一定注意預(yù)防！如果已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了一絲絲污染跡象，就要做到早發(fā)現(xiàn)、早挽救！如果細(xì)胞能夠救回來(lái)，還是可以繼續(xù)實(shí)驗(yàn)的，不耽誤實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。不過(guò)，確實(shí)也很難*清除??！如果說(shuō)實(shí)在救不回來(lái)，那就再買一株新的細(xì)胞吧！最后，要買細(xì)胞的同學(xué)和老師，可以電話或郵箱聯(lián)系我們哦！

支原體污染對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)造成多方面的不良影響，已經(jīng)成為在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的一個(gè)嚴(yán)重問(wèn)題，嚴(yán)重干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。因此，定期進(jìn)行支原體檢測(cè)和去除，確保無(wú)支原體存在細(xì)胞培養(yǎng)體系內(nèi)才能獲得準(zhǔn)確有效的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

什么是支原體（Mycoplasma）

支原體是1898年Nocard等發(fā)現(xiàn)的一種類似細(xì)菌但不具有細(xì)胞壁的原核微生物，能在無(wú)生命的人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖，直徑50-300nm，能通過(guò)細(xì)菌濾器。過(guò)去曾稱之為類胸膜肺炎微生物（pleuropneumonia-like organism，PPLO）。1967年正式命名為支原體。

支原體又稱霉形體，支原體細(xì)胞中可見(jiàn)的細(xì)胞器只有核糖體（支原體是原核細(xì)胞，原核細(xì)胞的細(xì)胞器只有核糖體）。支原體是目前發(fā)現(xiàn)的smallest、simplest的原核生物，可以輕松地通過(guò)濾膜，混入培養(yǎng)系統(tǒng)中，呈高度多形性，多數(shù)呈球形，也有桿形、絲狀、分支狀等多種形態(tài)。通常依附在細(xì)胞膜表面，支原體沒(méi)有剛性的細(xì)胞壁，因此普通的抗生素對(duì)它根本不起作用，實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的種類有：口腔支原體、精氨酸支原體、豬鼻支原體、發(fā)酵支原體、人型支原體、唾液支原體、肺支原體和梨支原體等。

支原體污染的后果

細(xì)菌和真菌造成的污染相對(duì)比較容易檢測(cè)、預(yù)防和去除，然而支原體造成的污染很難察覺(jué)，即使生長(zhǎng)密度高達(dá) 10^7-10^9 CFU/mL，也很難有污染跡象（渾濁、pH變化等）。支原體污染后會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)變慢，狀態(tài)變差，不會(huì)馬上使細(xì)胞致死，但會(huì)影響細(xì)胞內(nèi)的各種參數(shù)，如改變細(xì)胞膜抗原性，改變細(xì)胞新陳代謝，干擾核酸的合成，改變 DNA 轉(zhuǎn)染效率，導(dǎo)致染色體畸變等。 

支原體污染來(lái)源

1. 工作環(huán)境的污染

2. 培養(yǎng)基或其他試劑的污染

3. 污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染

4. 實(shí)驗(yàn)器材帶來(lái)的污染

5. 操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)

6. 用來(lái)制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。

1. 疑似支原體污染，可通過(guò)檢測(cè)來(lái)確認(rèn)是否污染；

2. 經(jīng)檢測(cè)沒(méi)有發(fā)現(xiàn)支原體污染，可采用支原體預(yù)防試劑，在平時(shí)實(shí)驗(yàn)中做好環(huán)境和實(shí)驗(yàn)用具的消毒工作；

3. 經(jīng)檢測(cè)確為支原體污染，使用支原體去除試劑進(jìn)行挽救；如果救不回來(lái)的，只能重新復(fù)蘇一管或者引進(jìn)新的細(xì)胞；如果能夠挽救回來(lái)，后續(xù)實(shí)驗(yàn)中要定期采用支原體預(yù)防試劑，避免支原體的污染。

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